کروماتوگراف مایع فوق سریعProminenece UFLC

تحلیل سریع همواره به عنوان یک موضوع مهم فنی مورد استفاده قرار گرفته است، اما با گسترش سریع LCMS، افزایش قیمت عملکرد به یک مسئله فوری تبدیل شد و به یک عامل مهم برای افزایش سرعت تبدیل شد.
تجزیه و تحلیل سریع به معنی کوتاه کردن زمان تجزیه و تحلیل است که معمولا با کوتاه کردن ستون های کروماتوگرافی یا افزایش جریان در فاز جریان به دست می آید. با این حال، با استفاده از ستون پر کننده معمول با اندازه ذرات 5 میکرومتر، عملکرد جداسازی با استفاده از هر روش به طور قابل توجهی کاهش می یابد و در نتیجه سرعت را از دست می دهد.
بنابراین دو روش زیر توسعه یافته اند:
• استفاده از مواد کوچک
این روش جداسازی سریع را امکان پذیر می کند. با این حال، با توجه به افزایش مقاومت جریان در ستون کروماتوگرافی، فشار مختلف اجزای ابزار و ستون کروماتوگرافی نیز به طور قابل توجهی افزایش خواهد یافت.
• جداسازی دمای بالا
دمای بالاتر می تواند انتشار مواد را تسریع کند، در حالی که مقاومت جریان در ستون کروماتوگرافی را کاهش می دهد و جداسازی سریع را امکان پذیر می سازد. تجزیه و تحلیل دمای بالا در کاهش فشار ستون موثر است، اما دمای بالا باعث خرابی ستون کروماتوگرافی می شود و باعث تجزیه نمونه می شود که در هنگام کاربرد توجه شود.
برای حل مشکل فشار پشتی، ابزارهای اختصاصی برای بهبود توانایی تحمل فشار توسعه یافته اند که معمولا گران تر هستند. با این حال، این ابزارهای اختصاصی مجبور به سازش در مورد عملکرد نمونه گیری و حساسیت بودند. علاوه بر این، ستون های پر کننده بسیار ظریف، سخت افزار مورد نیاز است، روش تجزیه و تحلیل توسعه یافته با استفاده از این ستون کروماتوگرافی به قربانی انطباق پذیری است. بنابراین اگر این ابزار برای تجزیه و تحلیل معمولی HPLC استفاده شود، کارایی آن کمتر خواهد شد.
پشتیبانی از جداسازی سریع
Prominence با استفاده از اجزای استاندارد، می تواند نیازهای محققان را برای تجزیه و تحلیل سنتی و تجزیه و تحلیل با سرعت بالا برآورده کند و همچنین می تواند از دمای عملیاتی تا 85 درجه سانتیگراد پشتیبانی کند، بنابراین تجزیه و تحلیل سریع تحت فشار پایین تر را امکان پذیر می کند، در حالی که عملکرد تجزیه و تحلیل و سطح جریان این ابزار حتی در پیکربندی های گران تر نیز نادر است.
Prominence UFLC از تجزیه و تحلیل سریع با ویژگی های زیر پشتیبانی می کند:
• لوله های کوچک ستون و استخر جریان با حجم کوچک اثر گسترش اوج خارج از ستون را کاهش می دهد.
• استفاده از ستون کروماتوگرافی Shim-pack XR-ODS با اندازه ذرات 2.2μm.
Shim-pack XR-ODS نسل جدیدی از ستون های کروماتوگرافی تجزیه و تحلیل سریع است که با توجه به ظریف شدن مواد پر کننده ذکر شده در بالا، تعادل هوشمندانه ای را از رابطه بین کارایی جداسازی و فشار پیدا می کند تا اثر جداسازی را افزایش یا حفظ کند و در عین حال زمان تجزیه و تحلیل را کوتاه کند.

Chromatographic conditions; column: described above, mobile phase: water/acetonitrile (3/7,v/v), flow rate: described above, temperature: 40 ℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(XR-ODS), 10μL(VP-ODS).
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
نمونه گیری خودکار Prominence SIL-20A نمونه گیری فوق العاده سریع 10 میکرولیتر را در 10 ثانیه انجام می دهد.

Chromatographic conditions; column: Shim-pack XR-ODS(3mm i.d.×30 mm, 2.2μm), mobile phase: water/acetonitrile(4/6 to 2/8 in 0.4 min, convex gradient), flow rate: 3mL/min, temperature: 80 ℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(each 800 nm ol),.0.1 min delayed injection.
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
• پشتیبانی از تجزیه و تحلیل دمای بالا تا 85 درجه سانتیگراد.
دما و تحلیل سریع: با افزایش دمای ستون، تعداد برج های تئوری افزایش می یابد، اثر ستون افزایش می یابد و فشار ستون کاهش می یابد.

Chromatographic conditions;
mobile phase:　water/acetonitrile (3/7, v/v),
detection: absorbance at 245 nm.
اوج ها: 1: پنزیل استون 2: پنزیل استون 3: پنزیل بوتیتون 4: پنزیل پنتون 5: پنزیل هکسون 6: پنزیل آنتون 7: پنزیل سینتون
تأثیر دما بر ترکیبات: تجزیه و تحلیل دمای بالا در کاهش فشار ستون موثر است، اما دمای بالا باعث خرابی ستون کروماتوگرافی، منجر به تجزیه نمونه و غیره در زمان استفاده نیاز به توجه است. تجزیه و تحلیل دمای بالا فقط به عنوان یک ابزار کمکی برای تجزیه و تحلیل سریع استفاده می شود.
• آشکارسازهای با فرکانس نمونه گیری بالا، می توانند اطلاعات را بدون از دست دادن اطلاعات به سرعت بدست آورند.
نرم افزار تخصصی برای تبدیل روش های کروماتوگرافی، تبدیل شرایط کروماتوگرافی معمولی به شرایط UFLC را به راحتی انجام می دهد، تضمین انطباق پذیری روش های تجزیه و تحلیل.

تجزیه و تحلیل سریع
تکرار زمان نگهداری اجزای در جداسازی سریع سخت تر از تجزیه و تحلیل معمولی است. تکرارپذیری زمان حفظ (RSD) و ریشه مربع زمان معکوس افزایش می یابد، بنابراین نیاز به عملکرد انتقال مایع دقیق تر از تجزیه و تحلیل معمولی است. Prominence UFLC می تواند قابلیت تحویل مایع با وضوح 3 nL / دقیقه را تضمین کند، قابلیت تحویل مایع با پاسخ 0.1 ثانیه در هنگام تحویل مایع، می تواند تکرار زمان نگهداری بسیار برتر را انجام دهد.

جریان بالا چیست
هدف کروماتوگرافی مایع سریع جریان بالا است، به این معنی که نمونه های بیشتری در هر روز یا ساعت تجزیه و تحلیل می شوند. برای دستیابی به جریان بالا، نه تنها زمان تجزیه و تحلیل یک نمونه باید کوتاه شود، بلکه کل زمان نمونه برداری و تجزیه و تحلیل باید بهینه شود. تلاش برای سرعت نه تنها زمان تحلیل را کوتاه می کند بلکه چرخه تحلیل را نیز کوتاه می کند. سرعت تزریق نمونه در پرومیننس UFLC ۱۰ ثانیه است که دوره تجزیه و تحلیل را بسیار کوتاه می کند.

نمونه های کاربردی

تجزیه و تحلیل UFLC از اسید های آمینو مشتق PTC

تجزیه و تحلیل اسید آمینو دو روش تشخیص وجود دارد، یکی از آنها بعد از استفاده از جداسازی ستون کروماتوگرافی تبادل یون، مشتق کردن برای تجزیه مجدد ستون است، و دیگری مشتق کردن قبل از ستون است که بعد از مشتق کردن، با استفاده از ستون کروماتوگرافی معکوس برای جداسازی است. از دیدگاه تجزیه و تحلیل سریع، روش مشتق پیش از ستون موثر است. در اینجا، تجزیه و تحلیل اسید های آمینی با استفاده از Shim-pack XR-0DS در زمان کوتاهی انجام شد.
مشتق با استفاده از استر بنیل ایزوسییانات. روش مشتق پس از ستون 1 ساعت طول می کشد و روش مشتق قبل از ستون با استفاده از ستون های کروماتوگرافی معمولی 25 دقیقه طول می کشد و می تواند به 4 دقیقه کوتاه شود.

تجزیه و تحلیل UFLC

رنگدانه هایی که به مواد غذایی اضافه می شوند ترکیبات مصنوعی و طبیعی هستند که بسیار محلول در آب هستند و اغلب با HPLC تجزیه و تحلیل می شوند. اما زمانی که ترکیب چندین رنگ، تجزیه و تحلیل به طور همزمان طول می کشد. در اینجا یک مثال از تجزیه و تحلیل همزمان رنگدانه با استفاده از Shim-pack XR-ODS Ultra Fast LC ارائه شده است. نتایج تجزیه و تحلیل همزمان 12 رنگ ماده به عنوان نمودار زیر است. زمان تجزیه و تحلیل مورد نیاز برای استفاده از LC معمولی 50 دقیقه است، در حالی که با استفاده از LC فوق سریع، تجزیه و تحلیل در حدود 6 دقیقه انجام می شود.

تجزیه و تحلیل UFLC از هیدروکربن های عطری چند حلقه ای (PAH)

PAH ها مواد شیمیایی هستند که میزان آلودگی اتمسفر از گازهای خروجی مانند وسایل نقلیه را تعیین می کنند. PAH ها سرطان زا هستند، بنابراین نظارت بر اتمسفر این مواد یک اندازه گیری مهم است. PAH ها فلوروسنت قوی را نشان می دهند و می توانند با استفاده از آشکارسازهای فلوروسنت برای تجزیه و تحلیل حساسیت بالا استفاده شوند.
برای تجزیه و تحلیل این 10 نوع PAH، در حالت جداسازی بدون از دست دادن، در مقایسه با LC معمول (زمان تجزیه و تحلیل 50 دقیقه)، UFLC تجزیه و تحلیل سریع 10 برابر (زمان تجزیه و تحلیل 5 دقیقه) را به دست آورد.